大鼠肾线粒体25-羟基维生素D3 1 α -羟化酶的测定。

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江藤TA，中村Y，谷口T，宫本K，长原子J，前田Y，东S，奥田k，濑口T

大鼠肾线粒体25-羟基维生素D3 1 α -羟化酶的测定。

生物化学。1998年4月10日;258(1):53-8。

PubMed ID

9527847 (PubMed视图

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摘要

25-羟基维生素D3 1 α -羟基化酶[钙化醇，NADPH:氧氧化还原酶(1-羟基化)，EC 1.14的测定方法。13.13]在大鼠肾脏中。线粒体和核部分被3-[(3-胆酰胺丙基)-二甲氨基]-1-丙磺酸盐(Chaps)有效地溶解。通过随后的超离心增溶悬浮液，抑制因子(s)在哺乳动物的影响被去除。然后用饱和量的肾上腺素还蛋白和nadph -肾上腺素还蛋白还原酶的重建法测定该酶。用HPLC法对产物进行分析，并在265 nm处监测吸光度。酶的活性不仅取决于培养基的pH值，还取决于缓冲液的种类。N,N-二(2-羟乙基)甘氨酸是最好的缓冲液。在30℃时，反应速度至少可达10分钟，此时已形成足够量的分析所需的产物。当蛋白质浓度达到0.8 mg /ml时，酶活性与蛋白质浓度呈线性关系。 Under the best assay conditions established, the maximal velocity of enzyme in the rachitic rat was 12.9 pmol of product/min/mg of protein, which was 30- to 1000-fold higher than those reported by other authors with the enzyme of rachitic rat. Michaelis constant was 1.8 microM. Specific activity with the enzyme of normal rat was 0.25 pmol of product/min/mg.

引用本文的药物库数据

药物酶

药物	酶	种类	生物	药理作用	行动
骨化二醇	25-羟基维生素D-1 α羟化酶，线粒体	蛋白质	人类	未知的	底物	细节